郭忠 廖禹东 赣南卫生健康职业学院 江西赣州 341000

　　作者简介 : 郭忠 (1963.12),男,江西安远,副教授,硕士。研究方向:化学分析研究及职业教育研究。

　　基金项目:江西省教育厅科学技术研究项目 课题编号181577

　　摘 要:燕窝一直是国人眼中的传统滋补圣品,其重要的生物活化因子是被誉为“美容基因”的EGF,具有高效的抗氧 化作用。为了区分官燕与金丝燕窝EGF含量及体外抗氧化的不同,给燕窝的品质分类及消费者对燕窝选择提供科学依 据,研究利用分光光度法测定燕窝中EGF含量,根据利用紫外可见分光光度计测得的样品吸光度,计算样品中EGF含 量。而EGF体外抗氧化实验则利用FRAP(铁离子还原能力)法,根据样品将Fe3+-三吡啶三吖嗪还原成深蓝色的 Fe2+-三吡 啶三吖嗪, 并在470nm处通过比色测出的样品吸光度,比较EGF抗氧化活性的强弱。结果显示,金丝燕的活性物质EGF含 量与抗氧化能力均高于官燕。

　　关键词:燕窝;EGF含量;抗氧化;实验;研究

　　燕窝一直被人们视为上等滋补圣品。因燕窝当中含有对人 体有益的一系列健康成分,其中含有一种被誉为“美容基因”的 重要生物活性因子 EGF。对燕窝中的 EGF 含量进行分析,以 及进行抗氧化能力的研究,不仅有利于根据燕窝的品质进行分 类,规范管理燕窝市场,减少市场的混乱现象,还可以比较不 同品种燕窝之间的差异,充分利用燕窝的抗氧化能力。[1]

　　本文选择了 2 个价位不同种类的燕窝(分别为官燕,金丝 燕),生产年份一致,品牌加工方法一致,对其含有的活性成分 EGF 进行分析,并进行体外抗氧化实验观察,探讨官燕、金丝燕 两种燕窝中的活性物质 EGF 的含量及其抗氧化能力的异同。

　　1. 材料

　　1.1 仪器

　　托普乐公司生产的 hb-4 恒温振荡。上海越重仪器生产公 司生产的 cf-501 旋转蒸发仪器。日本富士生产的 uv1000 紫外 可见分光光度计。

　　1.2 药品与试剂

　　碳酸钠、芦丁、三氯化铁、铁氰化钾、以及甲醇均为分析纯。生 产商:华西生物实验有限公司。TPTZ(Fe3+- 三吡啶三吖嗪)、二 甲基亚砜为分析纯,生产商:南京建成生物工程研究所。

　　1.3 样品

　　官燕、金丝燕,均来源于印尼巴沙某燕窝产业园

　　2. 方法

　　2.1 样品的处理

　　将 450g 的燕窝样品放置在 1000ml 纯净水当中进行发泡,发泡器皿要求无油无水,并在零上 5°C -15°C的温度范围之内,对燕窝的泡发温度进行控制,精确到小数点四位。

　　2.2 EGF 的提取法

　　用旋转蒸发仪器对于燕窝中的有效 EGF 活性物质进行提 取。之后将含有 EGF 活性物质的提取样品放置在 50ml 的提取试管当中,按照 1:20 的比例加入 40% 的无水乙醇,置于高速离心机中进行离心,转速为每分钟 4000 转,经离心之后,放置 3min。等待样品分层之后,在70°C的环境之下,对EGF活性物质进行水浴,水浴 15min 之后,应用过滤容器进行上层物质的抽取,再将抽取到的 50ml 样品放置在 100ml 的容量瓶中,待含量测定用。[2]

　　2.3 EGF 含量测定

　　2.3.1 标准储备液的准备

　　用移液管从 2.2 步骤中的 100ml 容量瓶抽取 25ml 待测样品,置于 1000ml 的检测瓶中,用蒸馏水稀释,获得浓度为0.045% 毫克每毫升的标准储备液,放置在 25°C的保存环境中进行储存,24h 之后提取检测。

　　2.3.2 EGF 含量测定法

　　采用分光光度法进行两种燕窝中的 EGF 含量分析。具体操作如下:(1)分别准确吸取 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml 的标准 EGF 活性物质溶液,放置在 25ml 的棕色容量瓶当中,加入福林酚试剂 1.0ml,静置 5min 之后摇匀,并加入 10% 浓度碳酸氢钠溶液待充分溶解之后,放置在 25°C的封闭环境中进行保存。(2)从(1)中 5 种提取液分别吸取 0.1ml,置于 5 个 50ml 容量瓶中,分别加入 10ml 的蒸馏水,充分摇匀后放置在 25°C避光环境中,静置 30min,让其进行充分的化合反应。之 后用紫外可见分光光度计进行含量分析。波长调至 470nm,每一样品进行平行 5 次实验测定吸光度,进行其含量计算。[3]

　　2.4 体外抗氧化能力的实验利用 FRAP( 铁离子还原能力 ) 法进行 EGF 体外抗氧化能 力的研究。原理为具有还原能力的抗氧化物质将 Fe3+- 三吡啶 三吖嗪还原成深蓝色的 Fe2+- 三吡啶三吖嗪 , 并于 517nm 处具有最大吸收光,通过比色测出的样品吸光度比较抗氧化活性的强弱。以二甲基亚砜 (DMSO) 为溶剂 , 比较相同浓度 (100mg%) 体外总抗氧化活性。以 37 °C时每 min 每 100mg 样品使反应体系的吸光度 A 值每增加 0 .01 为一个抗氧化能力单位 (U/ mmol), 具体步骤按试剂盒 ( 南京建成生物工程研究)进行。[4]3 结果与分析

　　3.1 相同燕窝 EGF 活性物质含量与吸光值的比较与结论

　　根据 A=KCL 计算公式,由实验测得的吸光度 A,计算样品中 EGF 的含量 c, 本文从实验数据及计算结果。按 2.3.2 中所述实验测得的吸光度计算的 EGF 的含量见表 3-1。

　　从表 3 中可以 -1 可以看出,将浓度皆为 0.045% 毫克每毫升的官燕与金丝燕标准储备液,分别稀释 5000 倍、2500 倍、1250 倍、830 倍及 625 倍,将波长调 470nm,分别进行其吸光度 A, 从 测得的吸光度 A 分别计算溶液中的 EGF 活性物质含量,从表 3-1 中显而易见金丝燕中的 EGF 活性物质含量>官燕当的 EGF 活性物质含量,即相同浓度的官燕与金丝燕溶液中 EGF 活性物质含量差别比较大。[5]

　　3.2 官燕与金丝燕中 EGF 活性物质抗氧化能力测定与比较

　　采用 FRAP( 铁离子还原能力 ) 法,以二甲基亚砜 (DMSO) 为溶剂, 比较相同浓度条件下(100mg%),官燕与金丝燕中的 EGF 活性物质体外总抗氧化活性,结果如下:

　　从表 3-2 可知,以二甲基亚砜 (DMSO) 为溶剂 , 相同浓度条件下。金丝燕的体外总抗氧化力显著高于官燕。

　　结语

　　综上所述,不同种类的燕窝在 EGF 活性物质含量和抗氧化能力方面都具有较大差异,从目前获得到的两种样品(官燕与金 丝燕)来看,相同质量的不同种类燕窝,金丝燕燕窝的 EGF 活性物质含量,明显高于官燕中的 EGF 活性物质含量,且体外总 抗氧化力也显著高于官燕。本文的研究分析结果表明:金丝燕燕 窝中 EGF 活性物质的含量以及体外抗氧化活性都高于官燕。此结论既有利于我们更好地区分燕窝之间的品质差异,从而规范消费市场,又可为消费者提供正确认识与选择燕窝的科学依据。

　　参考文献

　　[1]柳训才,张小江,张晓婷.固相微萃取/气相色谱-质谱联用技术测定燕窝 中挥发性成分[J].分析测试学报,2020,39(02):205-211.

　　[2]查圣华,王俊亮,廉翠翠.透明质酸胶原蛋白冰糖燕窝研制及其改善皮肤 水分功效[J].食品工业,2020,41(02):129-134.

　　[3]刘敬,邓仙梅,赵斌.近五年燕窝质量标准和药理功效研究进展[J].亚太传 统医药,2020,16(01):190-196.

　　[4]梅秀明,吴肖肖,乔玲.燕窝的营养成分和危害因子分析[J].现代食品科 技,2020,36(02):277-282+178.

　　[5]伍晓燕. 基于HPLC的燕窝与食品中唾液酸的含量测定及比较[D].上海 交通大学,2019.