文 / 贾　静　张凤改　刘小明

复配营养强化剂是一种经过加工、特别配制的、含有多种微量营养素成分的食品添加剂，又称为营养素预混料。复配营养强化剂的种类很多，针对不同人群、不同生理特点、不同劳动强度等可设计不同配方，用于保健品、面制品、固体饮料、功能食品、乳品等行业。目前，复配营养强化剂用于营养强化还是以维生素和矿物质为主导，在此基础上进行一系列的改良，如添加膳食纤维、低聚糖、氨基酸、不饱和脂肪酸等。

作为复配营养强化剂的重要组成部分，维生素的添加量是否达标对产品的营养强化效果及人体的生长发育有着很大的影响，目前国家标准里面没有针对复配营养强化剂的明确标准及检测方法。选取合适的检测方法对复配营养强化剂中常见维生素进行检测，可以进一步精确维生素的用量标准及提高检测准确性和检测效率。

二维液相色谱法测定维生素A、D、E在线分析。二维液相色谱并串联在线固相萃取(onlineSPE)技术，建立了食品中维生素A(VA)、维生素D(VD)及三种维生素E(VE)

异构体的中心切割快速分析方法。此方法将前处理皂化液直接进样，省去了液液萃取等复杂的前处理过程。第一维液相色谱对VA和VE进行分析，同时对VD进行初步净化；第二维液相色谱对VD进一步分离，整个分析过程只需一次进样，即可完成样品中VA、VD和VE的测定。该方法不仅可以节省大量的样品前处理时间，同时可以避免复杂的样品前处理过程导致的回收率不稳定现象。实验结果准确、重现性好，表明该方法可以用于多种食品基质中脂溶性维生素的常规快速检测。

采用二维液相色谱的中心切割模式，可对复配营养强化剂及其他产品中的维生素A、D、E进行同时分析测试，也可实现维生素D2、D3的分离及维生素E四种异构体的有效分离及准确定量，可有效降低复杂基质对测定的干扰，极大简化样品的前处理过程，提高工作效率，节省仪器和试剂耗材的成本。

分光光度法。光度分析法是通过测定被测物质在特定波长处或者一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析，同时也是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的特殊分析方法，现阶段维生素类的主要采取紫外分光光度法。

微生物法。微生物法利用了某种特定的微生物对特定的维生素有强大的特异性，是该微生物正常生长的必需因子。利用特定条件下，微生物的生长繁殖速度与溶液中某种维生素的含量呈一定的对应关系，对维生素进行定量分析。目前微生物法可以对大多数水溶性维生素进行测定，但对于测定的菌株有严格的要求且耗时较长，准确度较低，重现性较差。

生物检测试剂盒。生物试剂盒与微生物法测定维生素的原理一致，都是利用特定菌种生长对相应维生素需求的特异性，在一定控制条件下，将菌液接种至含有试样的培养液中，根据维生素含量与透光率（或吸光度值）的标准曲线计算出试样中的维生素含量。生物试剂盒与微生物法的不同主要是生物试剂盒采用孔板包被测试菌种，一般使用待测溶液体积较小，通过测定样品吸光度进行定量。若待测样品颜色较深，则对吸光度的测定有一定的影响。生物试剂盒一般孔板数较多，适合大批量样品测定，但是需要样品稀释倍数较大，样品含量较高的精密度较差。空白接种出现菌落生长、线性不好、重现性差等问题。

综上，维生素作为人体重要的营养成分，添加量需要准确定量。现行有效的维生素测定方法有很多种，包括食品安全国家标准，食品中各种维生素的测定、保健品中各类维生素的测定等，但每种标准都有一定的产品适用性。在进行分析实验时，实验人员可以根据产品的特性，合理选择不同的检测方法。（作者单位：郑州瑞普生物工程有限公司）